Uji Stabilitas Ekspresi Gen CryIAc dalam Transforman Jagung R3 dan R4
No Thumbnail Available
Date
2002-11
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Balai Penelitian Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian
Abstract
Pada tahun 2000 telah diperoleh transforman R2 dan R3 yang menunjukkan reaksi tahan terhadap penggerek batang jagung Asia, sehingga diduga transfor-man tersebut positif mengandung protein kristal produk gen cryIAc. Pada tahun 2001, gen cryIAc diuji ekspresinya pada transforman R3 dan R4. Uji ekspresi dilakukan dengan mendeteksi adanya protein kristal sebagai produk dari gen cryIAc. Deteksi protein kristal dilakukan dengan Dot Blot-ELISA. Untuk melaku-kan Dot Blot-ELISA serangkaian penelitian perlu dilakukan yang meliputi, pe-nyiapan protein kristal cryIAc sebagai kontrol positif, optimasi reaksi kemikalia ELISA dengan protein cryIAc dari isolat Bt (kontrol positif), dan reaksi kemikalia ELISA dengan protein cryIAc dari transforman. Dari 10 isolat Bt yang diduga mengandung cryIAc diamplikasi dengan primer spesifik terhadap gen cryIAc. Hasil amplifikasi menunjukkan bahwa 4 isolat mengandung fragmen DNA pada ukuran yang sesuai dengan harapan. Empat isolat tersebut diperbanyak dalam media Lurient Broth dan protein kristal cryIAc diisolasi dari isolat tersebut untuk digunakan sebagai kontrol positif. Dot Blot-ELISA terhadap protein kristal dari keempat isolat tersebut menunjukkan reaksi positif. Dot Blot-ELISA terhadap protein dari tanaman transforman menunjukkan reaksi negatif.
Description
Keywords
Ekspresi gen cryIAc, Dot Blot-ELISA