Browsing by Author "Sisharmini, Atmltri"

Now showing 1 - 1 of 1
  • No Thumbnail Available
    Item
    Teknik Isolasi DNA dan Analisis PCR Gen pinll pada Genom Ubi Jalar
    (Balai Penelitian Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian, 2002-11) Sisharmini, Atmltri; Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian
    Konfirmasi awal gen-gen target pada tanaman putatif transgenik akan sangat berguna, karena tanaman yang tidak mengandung gen yang diintroduksi dapat langsung diketahui, sehingga hanya tanaman yang mempunyai gen yang diinginkan yang digunakan untuk penelitian selanjutnya. Identifikasi terjadinya integrasi gen pada tanaman transgenik dapat dilakukan dengan teknik Polymerase Chain Reaction (PCR). Untuk dapat mendeteksi ada tidaknya gen target yang tersisip dalam genom tanaman ubi jalar transgenik dengan teknik PCR, diperlukan ONA terekstrak dengan kualitas dan kuantitas yang baik. Pada tahun 2001 dilakukan penelitian analisis molekuler untuk mengkonfirmasi ter jadinya integrasi gen p/nll ke dalam genom ubi jalar. DNA diisolasi dari daun tanaman putatif transgenik ubi jalar menggunakan 2 metode ekstraksi, yaitu metode CTAB dari Porebski ef al. dan Varadarajan dan Prakash yang dimodifikasi dan metode CTAB dari Tanaka dan Nakatani. Modifikasi dilakukan untuk mengurangi kadar polifenol dan polisakarida. Dari kedua metode ekstraksi DNA tersebut, metode CTAB dari Tanaka dan Nakatani mempunyai kualitas DNA yang lebih baik dibandingkan dengan metode CTAB yang dimodifikasi dari Porebski at al. dan Varadarajan dan Prakash. Pada analisis PCR, telah diamplifikasi sebanyak 13 tanaman ubi jalar putatif transgenik dan dari 13 tanaman ter sebut, belum ada yang positif mengandung gen p/nll.