Insersi Gen cry1Ab pada Tanaman Kedelai melalui Penembakan Partikel
No Thumbnail Available
Date
2005
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
BB Biogen
Abstract
Perakitan tanaman kedelai transgenik tahan hama penggerek polong menggunakan gen cry1Ab merupakan alternatif yang potensial dalam perbaikan tanaman. Gen tersebut dapat menghasilkan protein δ-endotoksin yang bersifat racun (insektisidal) terhadap larva serangga hama Lepidoptera. Insersi gen cry1Ab menggunakan metode penembakan partikel telah dilakukan di Laboratorium Biologi Molekuler, BB-Biogen pada tahun 2004. Tujuan penelitian adalah untuk mendapatkan tanaman kedelai hasil transformasi yang mengandung insersi gen cry1Ab. Dua varietas kedelai, Sindoro dan Wilis telah digunakan dalam penelitian ini. Sebanyak 230 kalus yang yang berasal dari eksplan embrio muda kedelai Wilis telah ditembak dengan plasmid pSBB yang mengandung gen cry1Ab dan pRQ6 yang mengandung gen hph (ketahanan terhadap higromisin) secara ko-transformasi. Penembak gen (gene gun) yang digunakan adalah Biolistic PDS 1000 He dari Biorad. Hasil regenerasi dan seleksi kalus Wilis hasil transformasi pada media yang mengandung higromisin diperoleh 28 embrio somatik yang kemudian tumbuh menjadi 5 planlet. Namun, kelima planlet ini gagal diaklimatisasikan. Kemudian sebanyak 810 kalus embrio Sindoro yang ditransformasi dengan plasmid dan metode yang sama menghasilkan 154 embrio somatik dan tumbuh menjadi 27 benih somatik (planlet). Planlet ini selanjutnya diaklimatisasi dan 2 di antaranya telah berhasil tumbuh menjadi tanaman. Analisis molekuler terhadap 22 kalus kedelai hasil transformasi dengan teknik PCR menggunakan primer spesifik menunjukkan 8 sampel positif mengandung gen cry1Ab. Kemudian analisis molekuler terhadap 5 sampel DNA daun dari planlet kedelai Sindoro hasil regenerasi menunjukkan positif mengandung gen cry1Ab.
Description
Keywords
Kedelai, insersi, gen cry1Ab, particle bombardment.