Evaluasi Tanaman Kedelai Generasi R1 Hasil Transformasi dengan Gen Proteinase Inhibitor II
No Thumbnail Available
Date
2001
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Balai Penelitian Bioteknologi TanamanPangan
Abstract
Penelitian dilakukan di Laboratorium Biologi Molekuler dan Rekayasa Genetik serta rumah kaca terbatas (FUT) Kelti Biologi Molekuler, Balai Penelitian Biotek-nologi Tanaman Pangan Bogor pada tahun anggaran 2000. Penelitian terdiri dari dua kegiatan, yaitu (1) bioasai tanaman kedelai transgenik R1 terhadap Etiella zinckenella Treit. dan (2) analisis molekuler gen pinII pada tanaman ke-delai R1 hasil transformasi. Penelitian bertujuan untuk mengetahui keberadaan dan ekspresi gen pinII pada tanaman kedelai generasi R1 hasil transformasi. Satu event tanaman hasil transformasi melalui Agrobacterium yang mengan-dung gen pinII telah diperoleh, yaitu AT1 (varietas Tidar) dan lima event tanam-an hasil transformasi melalui penembakan dengan gen pinII, yaitu dua dari vari-etas Wilis (WP1 dan WP2) dan tiga dari varietas Tidar (TP1, TP2, TP3). Semua event tanaman ini fertil kecuali TP3 dan selanjutnya biji/benih ditanam kembali untuk keperluan pengujian bioasai dan molekuler. Pengujian bioasai tanaman kedelai hasil transformasi terhadap larva E. zinckenella Treit. juga telah dilaku-kan. Beberapa individu yang diuji (khususnya WP1 dan AT1) memiliki ketahan-an terhadap hama ini yang ditunjukkan dengan rendahnya tingkat kerusakan pa-da polong/biji. Biji yang sehat selanjutnya dikoleksi untuk pengujian lebih lanjut. Pada kegiatan analisis molekuler, telah berhasil diisolasi DNA total dari semua individu R1 pada semua event menggunakan sampel daun muda dengan meto-de modifikasi Saghai-Maroof (CTAB). DNA sampel yang telah dimurnikan selan-jutnya digunakan untuk deteksi gen pinII menggunakan teknik Polymerase Chain Reaction (PCR) dengan primer spesifik untuk gen pinII. Hasil check PCR menunjukkan adanya beberapa sampel positif gen pinII, yaitu pada pita berukur-an 600 bp, di antaranya AT1-7, AT1-11, AT1-21, AT1-22, AT1-25, dan WP2. Benih tanaman yang PCR positif akan diteruskan untuk analisis generasi berikutnya.
Description
Keywords
Evaluasi, kedelai R1, transformasi, gen proteinase inhibitor II, analisis molekuler, bioasai