Analisis Molekuler Integrasi Gen PinII pada Ubi Jalar
No Thumbnail Available
Date
2003-12
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Balai Penelitian Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian
Abstract
Konfirmasi awal keberadaan atau integrasi gen-gen target pada tanaman putatif transgenik akan sangat berguna, karena tanaman yang tidak mengandung gen yang diintroduksi dapat langsung diketahui, sehingga hanya tanaman yang mempunyai gen-gen yang diinginkan yang digunakan untuk penelitian selanjut-nya. Identifikasi terjadinya integrasi gen pada tanaman transgenik dapat dilaku-kan dengan teknik PCR (Polymerase Chain Reaction). Untuk dapat mendeteksi ada tidaknya gen target yang tersisip dalam genom tanaman ubi jalar transgenik dengan teknik PCR, diperlukan DNA terekstrak dengan kualitas dan kuantitas yang baik. Pada tahun 2002 telah dihasilkan 26 tanaman ubi jalar putatif transgenik yang diduga mengandung gen pinII dan 9 tanaman dengan gen CP-SPFMV, yang akan dianalisis secara molekuler untuk mengkonfirmasi terjadi-nya integrasi gen pinII atau CP-SPFMV dalam genom ubi jalar. DNA diisolasi dari daun ubi jalar putatif transgenik menggunakan metode CTAB dari Tanaka dan Nakatani (2001). DNA ubi jalar yang dihasilkan mempunyai kemurnian 1,4-2,26 dengan konsentrasi 0,009-2,5 g/l. Analisis PCR dari 35 tanaman putatif transgenik menunjukkan bahwa tidak ada tanaman yang positif mengandung gen pinII maupun CP-SPFMV.
Description
Keywords
Ubi jalar, isolasi DNA, gen pinII, gen CP-SPFMV, analisis PCR